糖化血紅蛋白檢測是糖尿病診斷與長期血糖控制評估的標(biāo)準(zhǔn)，而基于離子交換層析原理的糖化血紅蛋柱管因其成本低、操作簡便，仍在基層醫(yī)療和資源有限地區(qū)廣泛應(yīng)用。盡管看似操作簡單，但若使用不規(guī)范，易導(dǎo)致結(jié)果偏差、重復(fù)性差甚至誤診。掌握
糖化血紅蛋柱管科學(xué)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)氖褂梅椒?，是實現(xiàn)分離清晰、定量準(zhǔn)確、結(jié)果可靠的關(guān)鍵。
一、使用前準(zhǔn)備：三查三凈原則
查試劑有效期：確認(rèn)柱管、溶血劑、洗脫液均在有效期內(nèi)，無沉淀或變色；
查樣本狀態(tài)：全血樣本應(yīng)EDTA抗凝，無溶血、脂血或凝塊，采集后7天內(nèi)檢測；
查環(huán)境條件：室溫穩(wěn)定（18–25℃），避免陽光直射或強(qiáng)氣流干擾層析過程。
二、規(guī)范操作流程
樣本預(yù)處理
取適量全血（通常25–50μL）加入溶血劑中，充分混勻，靜置5–10分鐘使紅細(xì)胞裂解；
混合液需澄清透明，若有絮狀物應(yīng)離心（3000rpm,5min）取上清。
上樣與層析
輕輕顛倒柱管使填料均勻沉降，打開下端塞子讓緩沖液自然流出至填料表面；
用移液器緩慢將溶血液沿管壁加入柱中，切勿沖散填料層；
待樣本滲入填料后，加入第一種洗脫液（通常為低離子強(qiáng)度緩沖液），洗脫HbA0等非糖化組分；
再加入第二種洗脫液（高離子強(qiáng)度），洗脫HbA1c組分，收集對應(yīng)洗脫液于比色管中。
比色測定
用分光光度計在指定波長（如415nm）測定各組分吸光度；
按公式計算：HbA1c%=（HbA1c吸光度/總血紅蛋白吸光度）×100%；
建議每批檢測包含質(zhì)控樣本（正常/異常水平）以驗證準(zhǔn)確性。
三、質(zhì)量控制建議
每月參與室間質(zhì)評（EQA），確保結(jié)果可比性；
建立室內(nèi)質(zhì)控圖，監(jiān)控批內(nèi)/批間變異系數(shù)（CV應(yīng)＜5%）；
若結(jié)果與臨床不符（如HbA1c與指尖血糖差異過大），應(yīng)復(fù)查或改用HPLC/免疫法確認(rèn)。
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更新時間：2025-12-08 
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